論文解析 | BeaverBeads? Streptavidin用于分選CD8+T細(xì)胞，純度高達(dá)95%！
以BeaverBeads? Streptavidin為分選工具，在脾和淋巴結(jié)樣本混合的單細(xì)胞懸液中，使用陰選的方式純化分選出CD8+T細(xì)胞，細(xì)胞純度高達(dá)95%！
研究背景 細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）通常稱為CD8+T細(xì)胞，是白細(xì)胞的亞部，為一種特異T細(xì)胞，專門分泌各種細(xì)胞因子參與免疫作用。對某些病毒、腫瘤細(xì)胞等抗原物質(zhì)具有殺傷作用，與自然殺傷細(xì)胞構(gòu)成機(jī)體抗病毒、抗腫瘤免疫的重要防線。Naive/靜息CD8+T細(xì)胞有驚人的能力，能擴(kuò)增和分化為細(xì)胞毒性效應(yīng)細(xì)胞，監(jiān)視體機(jī)并清除感染。CD8+T細(xì)胞的缺失會破壞抗腫瘤免疫，增加對腫瘤生長的敏感性。CD8+T細(xì)胞功能失調(diào)也可能引發(fā)過度的免疫反應(yīng)，從而導(dǎo)致免疫介導(dǎo)的損傷或病理。因此研究CD8+T細(xì)胞的分化機(jī)制對癌癥、傳染病和自身免疫性疾病的T細(xì)胞治療具有重要應(yīng)用價(jià)值。
使用BeaverBeads? Streptavidin陰選純化來自WT和C1qbp-tKO P14小鼠CD8+T細(xì)胞，通過同源CD90表達(dá)將供體細(xì)胞與宿主細(xì)胞區(qū)分開。在感染前1天，通過尾靜脈注射5×105細(xì)胞（感染3天）、5×104細(xì)胞（感染5天）和3×104細(xì)胞（感染7天）到受體小鼠體內(nèi)。在第3天和第8天，通過雙側(cè)腹腔注射，分別用2×105或5×105個單位的LCMV Armstrong菌株感染小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)流程示意圖（文章原圖）
線粒體磷酸化和有氧糖酵解磷酸化（OXPHOS）測試結(jié)果表明，C1qbp介導(dǎo)的OXPHOS增強(qiáng)對于CD8+T細(xì)胞分化的表觀遺傳調(diào)節(jié)是必不可少的。活化的CD8+ T細(xì)胞比活化的CD4+T細(xì)胞有更大的糖酵解和OXPHOS需求，CD8+T細(xì)胞受損OXPHOS的影響更大。
總之，研究發(fā)現(xiàn)C1qbp在CD8+T細(xì)胞中作為正調(diào)節(jié)因子的關(guān)鍵功能分化。通過控制與OXPHOS偶聯(lián)的代謝物，證明C1qbp有助于建立CD8+T細(xì)胞的表觀遺傳和轉(zhuǎn)錄程序，在線粒體代謝和CD8+T細(xì)胞之間提供了一種分化機(jī)制聯(lián)系。此外，這些代謝物補(bǔ)充或靶向OXPHOS可能在癌癥、傳染病和自身免疫性疾病的T細(xì)胞治療中有重要應(yīng)用。
